Иридодиагностика

Глава 3 СТРОЕНИЕ РАДУЖКИ ПО ДАННЫМ СВЕТОВОЙ И ЭЛЕКТРОННОЙ МИКРОСКОПИИ

Микроскопическое строение радужки, выявляемое путем световой и электронной микроскопии, приведено в соответствии с описанием, данным в классическом руководстве по гистологии глаза человека [Hogan М. J., Alvarado J. A., Weddel J. E., 1971]. Передний пограничный слой в зависимости от его толщины и количества содержащегося пигмента является структурой, определяющей расцветку радужки. В отличие от других исследователей указанные авторы считают, что эндотелиальное покрытие переднего пограничного слоя, отделяющее последний от влаги передней камеры, не является постоянным, существуя лишь на первых годах жизни ребенка. В дальнейшем, по мере роста организма, эндотелиальные клетки замещаются фибробластами. Здесь же, в переднем пограничном слое, сосредоточены меланоциты. Иногда встречаются скопления меланоцитов, возвышающиеся над поверхностью переднего пограничного слоя, с формированием пигментных пятен, так называемых невусов. Невусы развиваются из леммоцитов (шванновских клеток), что подтверждает их нейрогенную природу.

Попутно следует сказать, что источником возникновения всех меланоцитов организма, в том числе и меланоцитов радужки, является, как известно, нервный гребешок.

Передний пограничный слой, кроме указанных элементов, содержит множество капиллярных сосудов. При электронной микроскопии отчетливо видно, что пигментсодержащие меланоциты наряду с фибробластами располагаются в виде одного слоя. Электронная микроскопия выявляет также строение отдельного меланоцита, состоящего из ядра, многочисленных пигментных гранул, аппарата Гольджи, несущего секреторную функцию. Указанные элементы отграничены клеточной мембраной.

Передние слои радужки характеризуются в основном наличием двух типов клеточных элементов — фибробластов и меланоцитов (рис. 8), а также хорошо выраженной сетью коллагеновых волокон.

Рис. 8. Передние слои радужки (гистологическая схема) [Hogan М. ct аl., 1071].

_{Виден поверхностный слой фибробластов (1), за ним слой меланоцитов (2). Глубже расположены капилляры и соединительнотканные волокна.}

Эластичная ткань в радужке отсутствует. Коллагеновые волокна распространяются до переднего пограничного слоя, сфинктера и дилататора зрачка, соединяясь в области корпя радужки с цилиарным телом. При зрачковых реакциях, приводящих в движение всю иридопупиллярную диафрагму, коллагеновая ткань формирует в радужке складки. При скрупулезном изучении коллагеновых элементов отмечается их ветвление, пересечение под большим углом с формированием ячеек. Коллагеновая субстанция в большом количестве сосредоточивается в толстых сосудистых стенках радужки, в трабекулах вокруг нервных стволов, а также между мышечными волокнами сфинктера зрачка. Следует заметить, что по краю зрачкового отверстия коллагеновые волокна расположены циркулярно, но, размещаясь между волокнами зрачкового сфинктера, они приобретают более меридиональный ход. У некоторых птиц, млекопитающих, а также у человека, по направлению к цилиарному телу коллагеновые элементы образуют арочные структуры, так называемые замки. Между ними в строме не исключено существование тканевых пространств, расположенных как радиально, так и меридионально, о чем свидетельствуют результаты экспериментов, заключающихся в наливке передней камеры индийскими чернилами, введении в переднекамерное пространство убитой микробной кокковой культуры. Введенные ингредиенты, как показывают данные световой и электронной микроскопии, поступают через лакуны и крипты радужки в соседние соединительнотканные пространства, диффундируя также в эндотелий сосудов и мышцы зрачка. Все это говорит о том, что радужка свободно проницаема для жидкости передней камеры и частиц диаметром 50—200 мкм. Введенный в переднюю камеру декстрин также проходит через передний пограничный слой радужки, фиксируясь в ее тканевых щелях.

При электронной микроскопии удается определить размеры коллагеновых волокон стромы. Ширина каждого волокна в среднем составляет 60 нм, аксиальная периодичность — 50–60 нм.

Установлен факт контакта стромы с переднекамерной влагой посредством маленьких фенестрирующих отверстий, допускающих прохождение структур размером от 50 до 200 мкм. Следует заметить, что строма радужки в процессе обработки гистологических препаратов экстрагируется, поэтому при микроскопическом исследовании между коллагеновыми фибриллами она имеет вид пустых пространств, в которых, однако, иногда сохраняется гранулированный материал, содержащий гликозаминогликаны.

Некоторые исследователи находят в радужке до 7 видов стромальных клеточных элементов. Помимо указанных выше фибробластов и меланоцитов, выявлены меланофаги, так называемые глыбистые клетки, тучные клетки, макрофаги, лимфоциты. Однако основными клеточными элементами являются фибробласты. Они локализуются вокруг сосудистых и нервных стволов, мышечных структур радужки, интимно соединены с поддерживающей их коллагеновой тканью. Эти клетки имеют митозы, содержат обычные органеллы, что свидетельствует об их участии в секреции крупных макромолекул. В структуру фибробластов входят особые элементы, так называемые реснички, назначение которых еще досконально не изучено. Возможно, они, выходя за пределы клетки, выполняют функцию ее фиксации. Меланоцит при электронной микроскопии имеет вид маленького овального тела, содержащего проминирующее ядро, ядрышко и многочисленные ветвящиеся отростки длиной до 100 мкм. Отростки соединяют клетку с соседними меланоцитами, фибробластами. Для меланоцитов типично их расположение вокруг адвентиции кровеносных сосудов. В отличие от меланоцита переднего пограничного слоя стромальный меланоцит имеет более выраженную цитоплазму, содержащую митохондрии, гладкий и зернистый эндоплазматический ретикулум и свободные рибосомы. Из цитоплазмы обычно возникает ресничный элемент, проникающий в строму радужки. Пигментные гранулы меланоцита представлены значительно меланизированными меланосомами, являющимися носителями зрелого меланина. Меланиновые гранулы окружены мембраной, заполнены меланопротеином. Расположенные в цитоплазме гранулы меланина на электронно-микроскопическом уровне удается проследить в различных стадиях их развития, начиная с премеланосом, меланосом и полностью меланизированных гранулярных элементов, которые видны в отростках меланоцитов.

Что касается глыбистых клеток, то они расположены в основном в зрачковом поясе радужки, особенно в окружности сфинктера зрачка. Эти клетки имеют округлую форму, цитоплазма заполнена меланиновыми гранулами, маскирующими клеточное ядро. Размер глыбистой клетки в диаметре составляет 100 мкм. Длина отростков варьирует от 1 до 2 мкм, их ширина около 0,1 мкм. Меланиновые гранулы в цитоплазме глыбистой клетки при электронной микроскопии имеют вид пузырьков, нафаршированных очень мелкими частицами меланина. Указанный пузырек можно рассматривать в качестве вторичной лизосомы, свидетельствующей о разрушении пигмента. Отсюда возникает понятие вторичной лиаосомы как резидуального тела. Пузырьки также содержат липиды и основной матрикс.

Следует заметить, что глыбистые клетки можно видеть в основном в радужке пожилых людей, у молодых их обнаружение затруднено.

Меланиновые гранулы в резидуальных телах, лежащих в задних отделах стромы, идентичны по размерам и форме гранулам пигмента пигментного эпителия, выстилающего заднюю поверхность радужки. В то же время следует сказать, что гранулы меланина, заключенные в резидуальных телах, расположенных в передних отделах стромы радужки, идентичны гранулам меланина в меланоцитах.

Не исключено, что глыбистые клетки являются макрофагами, элиминирующими большое количество меланиновых гранул. Единственное различие между макрофагами гематогенного происхождения и глыбистыми клетками радужки состоит в их размерах и форме. Макрофаги обычно имеют меньшие размеры и несколько вытянутую форму, а их резидуальные тела содержат немеланиновые субстанции.

Что касается тучных клеток (тканевые базофилы) стромы радужки, то они при микроскопическом исследовании являются довольно частой находкой, отличаясь от тучных клеток конъюнктивы более круглой формой и наличием на поверхности многочисленных выростов.

Сфинктер зрачка при световой микроскопии соответствует зрачковой части стромы радужки (рис. 9).

Рис. 9. Зрачковый пояс радужки (гистологическая схема) [Hogan М. et al., 1971].

Видны пересеченные волокна сфинктера зрачка.

Это лентовидное образование, длина которого составляет 0,75—0,8 мм при толщине от 0,1 до 0,17 мм. Зрачковый край сфинктера отделяется от пигментного эпителия узкой прослойкой коллагена. Мышца расположена на плотном соединительнотканном слое, который продолжается в сторону дилататора зрачка. Мышечные клетки сфинктера имеют веретенообразную форму и ориентированы параллельно зрачковому краю. Их отростки «плотно упакованы», отделяясь тонким, но плотным слоем коллагена стромы. Этот коллаген относится к структурам передних отделов стромы радужки, направляясь отсюда к сфинктеру и далее к дилататору зрачка. В пучках коллагеновой ткани содержатся артериолы и венулы, капилляры, чувствительные и двигательные нервы радужки. При электронной микроскопии установлено, что мышечные волокна сфинктера состоят из небольших групп из 5–8 мышечных клеток. Отростки клеток плотно соединяются друг с другом. Что касается расположения нервных волокон, то их можно видеть весьма близко от мышечных групп. Следует заметить, что в мышечные группы они не входят. Такое расположение нервов ведет к синхронной функции сокращения всех мышечных групп. Иннервируется, как считают, лишь одна мышечная клетка, от которой возбуждение на другие клетки распространяется благодаря их плотному соединению. Ядро в клетке располагается центрально, вокруг него размещены цитоплазматические органеллы (аппарат Гольджи, маленькие палочковидные митохондрии, многочисленные полирибосомы). Цитоплазма заполнена миофиламептами только одного типа. Однако встречаются уплотнения, напомипающие ленты поперечнополосатых мышц. На внутренней поверхности клеточной мембраны находятся пеноцитозные пузырьки. Базальная мембрана каждой клетки сфинктера сходна с базальной мембраной мышечных клеток других локализаций. Она контактирует с коллагеновыми волокнами, разделяющими мышечные группы. Между мышечными клетками и мышечными волокнами находится множество меланоцитов. Нервы видны в соединительной ткани, разделяющей группы мышечных клеток. В окружности мышечных групп нервные стволы образуют маленькие окончания, каждое из которых состоит из 2-4 нервных аксонов, окруженных леммоцитом, который сопровождает мышечные клеточные структуры, отделяясь от них пространством порядка 0,1 мкм.

Сосуды радужки делятся на артериолы, венулы и капилляры. Они имеют своеобразное строение приспособительного характера, позволяющее соответствовать меняющейся площади радужки, что связано с расширением и сокращением зрачкового отверстия. Все артериальные стволики имеют толстую коллагеновую адвентицию, ориентированную циркулярно по отношению к самому сосуду. Адвентиция отделена от эндотелиальной выстилки внутренней поверхности сосудистого русла небольшим пространством, содержащим фибриллы и основную субстанцию. Отойдя от большого артериального круга, сосуды быстро уменьшают свой диаметр. Подобно крупным артериям их стенка содержит 1–2 мышечных слоя, однако внутренняя эластическая пластинка при этом отсутствует.

По направлению к зрачковому отверстию все слои артериальной стенки истончаются. Оставшиеся мышечные элементы ориентированы продольно, в то время как адвентициальный коллаген располагается вокруг мышечного слоя циркулярно. В нем содержится некоторое количество фиброцитов и меланоцитов.

В адвентиции, формирующей наружные слои артериолы, выявляются две зоны. Внутренняя зона, примыкающая к мускульному слою, отличается содержанием менее плотного коллагена, в то время как в наружной зоне коллагеновая субстанция является более плотной. Мышечный слой артериол имеет толстую базальную мембрану, соединяющую его с эндотелиальной выстилкой.

Что касается вен радужки, следует сказать, что их стенка весьма тонка. Она состоит из эндотелия, тонкого слоя коллагена и отдельных мышечных клеток. Капилляры имеют лишь один слой нефенестрированного эндотелия. Эндотелиальная выстилка расположена на толстой базальной мембране, за которой следует слой продольно вытянутых коллагеновых волокон. Ячейки коллагеновой сети заполнены основной гранулярной субстанцией. Снаружи капилляр окружен толстым слоем циркулярно ориентированного коллагена, за которым следует соединительнотканный слой, содержащий меланоциты и фибробласты.

Нервы радужки можно обнаружить лишь с помощью специальных методик серебрения. Им свойственно формирование тонких сплетений вдоль сосудистых стволов. Отдельные нервные элементы в виде нитей можно встретить также в переднем пограничном слое радужки, строме, мышцах, переднем эпителии (но не в заднем пигментном эпителии). Большинство нервных стволов не миелинизированы, будучи окруженными леммоцитами. Симпатические и парасимпатические нервные стволы проникают в радужку вместе с чувствительными ветвями, окружая мышечные клетки и контактируя с ними. Чувствительные нервы, в отличие от вегетативных, рассеиваются по всей ткани радужки, не имея специальных окончаний.

Передний эпителий радужки рассматривается гистологами совместно с дилататором зрачка (рис. 10).

Рис. 10. Эпителиальные слои радужки (гистологическая схема) [Hogan М. et al., 1971].

_{1 — передний эпителий, состоящий из двух порций — эпителиальной и мышечной; 2 — задний эпителий.}

Толщина всего слоя составляет 12,5 мкм. Каждая клетка состоит из апикальной — эпителиальной части и базальной — мышечной, которая проникает в строму радужки. Мышечная поверхность эпителия представляется волнистой, его задняя граница трудно различима. Волокна дилататора имеют радиальное направление. На тангенциальных срезах депигментированных эпителиальных клеток видны их длинные отростки. Ядро клетки локализуется в ее эпителиальной части, где много пигмента. В цитоплазме видны многочисленные органеллы. Мышечная порция клетки содержит большое количество миофиламентов, однако они есть и в собственно эпителиальной ее части. Мышечная часть клеток простирается до средних отделов сфинктера зрачка. Здесь дилататор зрачка, распространяясь в строме радужки по направлению к сфинктеру, образует структуру, подобную шпоре. Этот элемент, называемый шпорой Фукса, является своеобразным утолщением мышцы, ее выростом. Другой подобный вырост — шпора Мишеля — расположен более периферийно. Указанные электронно-микроскопические находки верифицируют факт соединения обеих мышц — сфинктера и дилататора зрачка. П.о направлению к периферии дилататор доходит до корня радужки, постепенно исчезая. Что касается эпителия, то он продолжается на отростки цилиарного тела, выстилая их.

При электронно-микроскопическом исследовании видно, что мышечная часть переднего эпителия состоит из лентовидных плоских образований, идущих от апикальной порции. Именно они и формируют 3–5 мышечных слоев дилататора. Клетки переднего эпителия имеют базальную мембрану.

Интересен тот факт, что мышечные волокна дилататора соединяются по принципу «замка», играющего роль в передаче электрического возбуждения с вовлечением в этот процесс всей мышцы. Цитоплазма заполнена миофиламентами и небольшим количеством митохондрий, она содержит незначительные уплотнения, напоминающие диски в скелетной мускулатуре. Эти уплотнения обнаруживаются также в клеточных мембранах. Пиноцитозные пузырьки в клетках немногочисленны, пигментные гранулы редки. Ближе к мышечным отросткам удается видеть немиелинизированные нервные волокна, содержащие синаптические пузырьки. Нервные окончания входят в тесный контакт с мышцей, отделяющее их пространство составляет лишь 20 нм. Что касается дифференцировки симпатических и парасимпатических окончаний, то это является невозможным.

Апикальная (эпителиальная) порция переднего эпителия соединяется с задним эпителием, однако между ними все же существует узкое пространство в 20 нм, заполненное микровиллами. Они исходят из обоих эпителиальных слоев. В это пространство также проникают реснички, возникающие из цитоплазмы эпителиальных клеток (из так называемых базальных тел).

Вдоль апикальной поверхности клетки соединены многочисленными десмосомами и «замками».

Боковые поверхности клеточных мембран соединяются с помощью интердигитации, а также путем десмосом и «замков». В мышечной порции клеток переднего эпителия десмосомы исчезают, здесь видны лишь «замковые» соединения. Между боковыми поверхностями клеток существует интерцеллюлярное пространство. В районе апикальной порции клеток базальная мембрана отсутствует. В апикальной части находится большое количество клеточных органелл (митохондрии, пигментные гранулы, гранулярный эндоплазматический ретикулум и трубочки гладкого эндоплазматического ретикулума; в перинуклеарной области имеют место скопления свободных рибосом; видны миофиламенты).

Что касается клеток заднего эпителия, то следует сказать, что они носят чисто эпителиальный характер. Наличие сильной пигментации не позволяет хорошо видеть цитоплазму и другие детали клетки. Это возможно лишь после депигментации. Клетки имеют прямоугольную форму, меняя ее в складках, где форма приближается к пирамидальной. Высота клетки, по данным М.???тапп (1912), составляет 36–55 мкм, ширина 16–25 мкм. Цитоплазма содержит большое число круглых или сигароподобных пигментных гранул, которые являются значительно более крупными, чем в стромальных меланоцитах. В зрачковой области пирамидальная форма клетки более выражена, ее пигментация здесь не меняется, в то время как по направлению к периферии происходит процесс явной депигментации, все более усиливающийся в сторону цилиарного тела. При РАЭ-реакции в области задней поверхности пигментного эпителия обнаруживается тонкая базальная мембрана, отграничивающая его от задней камеры. Клеточная мембрана имеет большое число складок, распространяющихся в цитоплазму. Базальная мембрана в эти складки не заходит. Боковые поверхности клеток не являются складчатыми, между ними существуют контакты, видимые в форме пятен. Пространство, разделяющее клетки, составляет 20 нм. Цитоплазма содержит рассеянные крупные гранулы пигмента диаметром 0,8 мкм. Они черного цвета, что связано с поглощением осмия при обработке. Клеточное ядро имеет круглую форму, гладкую поверхность, в цитоплазме находятся отложения гликогена, экстрагирующегося при обработке. Около ядра расположены митохондрии и аппарат Гольджи. Дилататор зрачка иннервируется демиелизированными; аксонами и леммоцитами. Аксон находится также в тесном контакте с передним эпителием.

В последние годы опубликованы интересные данные по исследованиям японских авторов [в??а А., Зов?ека Н., Ок?а?., 1983], касающиеся иннервации меланоцитов хориоидеи. Иннервация меланоцитов кролика была изучена на ультраструктурном уровне с помощью трансмиссионного микроскопа при применении 5-гидроксидопамина. Определены 3 типа нервных окончаний, которые классифицированы как адренергические, холинергические, неадренергические и нехолинергические. Морфологически выявлены контакты между нервными окончаниями и меланоцитами в виде синапсов.